上海佰晔生物科技中心主营业务有细胞株和菌株、胎牛血清标准品和对照品、生化试剂ELISA试剂盒(仅供科研)、抗体抗原(仅供科研)、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备。

上海佰晔生物科技中心提供ATCC细胞库、ABMgood细胞库、BioLeaf细胞库、CBR细胞库、CellBank Australia细胞库、DSMZ细胞库、ECACC细胞库、JCRBC细胞库、KCLB细胞库、Paratechs细胞库、RIKEN细胞库、ScienCell细胞库的所有原代、传代(第三代)产品。

品牌如下:Abbexa ABMgood AG Scientific AHF analysentechnik AG Alomone Angioworld Astatech Avidity Badrilla Bioporto Biosynth BioTeZ Biotrend Calbiotech Cellsciences Click Chemistry Tools Corden Pharma Cosmo Bio Creative Biomart Crystal Chem Crystalgen Diagnovum Dianova Diatheva Eagle Manufacturing Company Echelon Biosciences Edgebio Emfret Epoch Life Science Eramask Exocell Fine Science Tools Genway Biotech Glen Research Glycosynth Gold Biotechnology Golden West Biologicals Herolab IHC World ImmuChrom GmbH Immunotools Immunovision Incell Innovative Research Innovrsrch Insitus Isosep IST Engineering Inc. J.G. Finneran Kainos Kamiya Biomedical Company Larodan Lc laboratories Ldn LGC Biosearch Technologies Lifecore List Labs lumiprobe Macrocyclics Medix Biochemica Meridian Life Science Microbix Moscerdam Mybiosource Neuro Probe Paratechs Peninsula Physitemp Polypure Polysciences Progen ProScience Inc. ProSpec QAbio Qorpak Quanta BioSciences QuickZyme Quidel Research Products International Corp. SCHMIDT BioMedTech Seven Hills Smartox Biotechnology Surgimax Swant SYSY Tedpella Torpac Torrey Pines Biolabs Trilink VIDIA ViroStat Virusys VP-scientific Xcessbio Zeptometrix。

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产品名称:HEp-2(人喉表皮样癌细胞)

货号 :SX-C0206

培养基 :\"完全培养基有售,用我们佰晔生物的完全培养基,细胞培养更省心!\"

规格 :5 10⁵cells/T25培养瓶

供应商 :佰晔生物

货期 :7-10天

HEp-2(人喉表皮样癌细胞)实验事项:

1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。

2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 预孵育\"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。

3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。

4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。

5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10 l),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。

7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。

建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。

洗板方法

1. 手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。

2. 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

计算

以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

◇ 注意事项:

收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分标本需添加抑肽酶。

◇ 液体类标本

标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积=100ul 检测种类。

◇ 血清:

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

◇ 血浆:

应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

◇ 尿液、胸腹水、脑脊液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

◇ 细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

◇ 组织标本:

切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1 g/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。